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DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE PROTEÍNAS & FRACIONAMENTO E DOSAGEM DAS PROTEÍNAS DO LEITE_Química_UTFPR_2010

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FILIPE MATOS PEREIRA LIMA JOÃO MARCOS LENHARDT SILVA LEONARDO VIANA DAS CHAGAS LIMA RAFAEL MARTINS DE PAULA RICARDO MELLEGARI DE OLIVEIRA DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE PROTEÍNAS & FRACIONAMENTO E DOSAGEM DAS PROTEÍNAS DO LEITE Relatório acadêmico apresentado a disciplina de Bioquímica do curso de Bacharelado em Química Tecnológica / Licenciatura em Química da Universidade Tecnológica Federal do Paraná - UTFPR – para obtenção de nota parcial. Orientador: Profª. Drª. Adriane Martins de Freitas
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  FILIPE MATOS PEREIRA LIMAJOÃO MARCOS LENHARDT SILVALEONARDO VIANA DAS CHAGAS LIMARAFAEL MARTINS DE PAULARICARDO MELLEGARI DE OLIVEIRA DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE PROTEÍNAS &FRACIONAMENTO E DOSAGEM DAS PROTEÍNAS DO LEITE CURITIBA2010 Relatório acadêmico apresentado adisciplina de Bioquímica do curso deBacharelado em Química Tecnológica / Licenciatura em Química daUniversidade Tecnológica Federal doParaná - UTFPR  – para obtenção denota parcial.Orientador: Profª. Drª. Adriane Martinsde Freitas.  1 CONSTRUÇÃO DA CURVA DE CALIBRAÇÃO Foram preparadas seis soluções padrão com base em uma solução padrão dealbumina de soro bovino (BSA) (5 mg/mL). As soluções apresentaram absorbância(540 nm) e concentrações relacionadas na Tabela 1: Tabela 1  – Concentração e Absorbância das soluções padrão Solução Concentração (mg/mL) Absorbância1 0 0,112 0,167 0,163 0,33 0,204 0,50 0,255 0,67 0,286 0,83 0,34Fonte: Autoria Própria. Descontando o valor do branco (solução 1): Tabela 2  – Concentração e Absorbância das soluções padrão II Solução Concentração (mg/mL) Absorbância1 0 0,002 0,167 0,053 0,33 0,094 0,50 0,145 0,67 0,176 0,83 0,23Fonte: Autoria Própria.  Com os dados da Tabela 2 construiu-se uma curva de calibração: Gráfico 1  – Concentração VS Absorbância (Padrão) Fonte: autoria Própria. O coeficiente de correlação (R) obtido foi de R = 0,99521. A equação da retaobtida é dada por:Absorbância = 0,26391 [Proteína] + 0,0042 (1)1.1 DETERMINAÇÃO DO TEOR DE PROTEÍNASCom a equação da reta e as absorbâncias de soluções de uma amostradesconhecida é possível fazer a quantificação de proteína na amostra. As absorbânciasdas soluções foram relacionadas na Tabela 3: Tabela 3  – Absorbância das soluções desconhecidas Solução Volume de amostra (mL) Absorbância7 0 0,128 1 0,239 0,5 0,1710 0,4 0,16Fonte: Autoria Própria. Descontando o branco das absorbâncias (solução 7):  Tabela 4  – Absorbância das soluções desconhecidas II Solução Volume de amostra (mL) Absorbância7 0 0,008 1 0,119 0,5 0,0510 0,4 0,04Fonte: Autoria Própria. As absorbâncias da Tabela 4 foram utilizadas na equação (1) e assim foi obtidauma concentração para cada solução: Tabela 5  – Concentração das soluções desconhecidas Solução Concentração (mg/mL)8 2,639 2,5310 2,60Fonte: Autoria Própria. As concentrações encontradas foram corrigidas, pois volumes diferentes deamostra foram utilizados. Para tal utilizou-se a seguinte equação:C 1 V 1 =C 2 V 2 (2)C 1 é a concentração corrigida, C 2 é a concentração determinada, V 1 é o volumede amostra utilizado e V 2 é 6 mL (volume da solução): Tabela 6  – Concentração das soluções desconhecidas II Solução Concentração (mg/mL)8 2,409 2,0810 2,03Fonte: Autoria Própria. Com os três dados pode-se fazer uma média e expressar o valor daconcentração de proteína na amostra desconhecida:[Proteína] = (2,17 ± 0,164)
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